Limbah kulit biji kakao di Indonesia yang cukup banyak dapat dimanfaatkan sebagai minuman probiotik karena memiliki kandungan protein kasar 16.60% dan serat kasar 25.10 %. Kandungan serat kasar tersebut dapat dimanfaatkan sebagai minuman probiotik dengan menggunakan bakteri Lactobacillus casei. Penelitian ini bertujuan menentukan kualitas hasil pembuatan minuman probiotik kulit biji kakao berupa jumlah bakteri, kadar asam laktat, pH, dan mengetahui pengaruh waktu fermentasi dan penambahan glukosa yang optimum. Perlakuan dalam penelitian ini adalah proporsi kulit biji dan susu sapi 1:3, penambahan glukosa sebanyak 1, 2, 3, 4, dan 5 gr, dan waktu fermentasi selama 24, 48, 72 dan 96 jam yang diinkubasi pada suhu ruang. Parameter analisis lain adalah kadar air, kadar asam laktat, jumlah bakteri dan pH. Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa proses pembuatan minuman probiotik yang optimal diperoleh kadar pH 3.73, asam laktat sebesar 1.0724 % dan jumlah bakteri 3.75 x 104 koloni per mL sampel pada waktu fermentasi selama 96 jam dengan penambahan glukosa 4 gr.